淋巴细胞特异性基因敲除：Cd2-2A-CreERT2诱导型Cre模型

T细胞与B细胞的基因功能研究，长期受困于一个现实问题：许多基因并非只在淋巴细胞中起作用，全身性敲除往往引发多系统异常，甚至胚胎期就难以存活，表型难以归因于淋巴细胞本身；而组成型淋巴Cre在发育早期就开始重组，成年后的基因功能容易被早期事件掩盖，无法区分基因在发育阶段与成熟阶段的作用。对于自身免疫病、肿瘤免疫和感染免疫等方向的研究者来说，这种时间维度上的混淆尤为棘手——基因在成熟淋巴细胞中的真实功能往往被发育期效应所掩盖。要让基因操作既落在淋巴细胞上，又落在正确的时间点，诱导型Cre工具是最直接的答案：驱动基因在目标细胞中表达，重组酶活性又可由诱导剂控制。Cd2（又称LFA-2）可以提供这样的驱动，作为淋巴细胞表面黏附分子，它在T细胞和B细胞（包括所有B细胞和T细胞祖细胞）中表达。

该品系将2A-CreERT2-WPRE-pA共表达结构插入到小鼠内源Cd2基因终止密码子前，使诱导型CreERT2随内源Cd2启动子同步表达。CreERT2的活性由他莫昔芬（Tamoxifen）控制：未诱导时融合蛋白滞留于细胞质，处于无活性状态；诱导后其代谢产物与ERT结构域结合，重组酶进入细胞核发挥重组酶活性。与携带loxP位点侧翼目的基因的小鼠交配后，经诱导即可在T细胞和B细胞中敲除floxed基因序列。

现有验证数据覆盖了T细胞层面：Cd2-(2A-CreERT2-WPRE-pA)小鼠与报告基因品系交配后，T细胞中可检测到报告基因表达，说明CreERT2在T细胞中能够发挥重组活性。

图. 实验数据证明Cd2-(2A-CreERT2-WPRE-pA)小鼠在T细胞中有表达

其价值体现在两个方向。一是成熟T细胞的功能研究：借助Cd2在T细胞中的表达，在T细胞中诱导性敲除目的基因，可追踪T细胞活化、分化与效应功能的分子机制。二是B细胞与体液免疫研究：对于研究B细胞发育、抗体产生或免疫耐受的课题，可在B细胞及其祖细胞中进行条件性基因操作，或与floxed品系组合构建淋巴细胞特异性的疾病模型，适用于自身免疫病、肿瘤免疫与感染免疫课题。

Cd2-2A-CreERT2由南模生物研发，目录号NM-KI-18017。如需了解品系详情与验证资料，可在南模生物官网按目录号检索，或致电400-728-0660咨询技术顾问，获取floxed品系搭配与实验设计建议。

诱导型Cre 和组成型 Cre 有什么区别？

组成型Cre 从发育早期即开始重组，可能改变淋巴细胞亚群组成，使成年表型分析变复杂。Cd2-2A-CreERT2 属于诱导型工具：他莫昔芬诱导后重组酶入核启动重组，研究者可自主选择基因敲除的时间窗口，将基因功能锁定在成熟淋巴细胞阶段，适用于需要区分发育期与成熟期基因作用的实验。

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